.

Dans le film, Ben Stiller joue le rôle de Larry Daley, qui devient le gardien de nuit au Musée d'Histoire Naturelle de New York. Grâce à une tablette magique égyptienne, les expositions du musée prennent vie chaque nuit. Larry doit alors gérer les diverses aventures et frasques des personnages historiques et des créatures animées.

Le film mélange comédie et aventure fantastique, mettant en vedette des personnages historiques tels que Theodore Roosevelt (interprété par Robin Williams), Attila le Hun, Sacagawea, Octavius et bien d'autres. Larry tente de maintenir l'ordre et la paix au musée tout en découvrant les défis uniques que cela implique.